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    液相色譜儀特點(diǎn)及具體應(yīng)用

    更新時間:2017-12-04        閱讀:2756

     

    液相色譜儀的系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。

     


    液相色譜儀色譜特點(diǎn):

    高壓--壓力可達(dá)150~300 kg/cm2。色譜柱每米降壓為75 kg/cm2以上。

    高速--流速為0.1~10.0 mL/min。

    --塔板數(shù)可達(dá)5000/米。在一根柱中同時分離成份可達(dá)100種。

    高靈敏度--紫外檢測器靈敏度可達(dá)0.01ng。同時消耗樣品少。

    HPLC與經(jīng)典液相色譜相比有以下優(yōu)點(diǎn):

    速度快-通常分析一個樣品在15~30 min,有些樣品甚至在5 min內(nèi)即可完成。

    分辨率高--可選擇固定相和流動相以達(dá)到*分離效果。

    靈敏度高--紫外檢測器可達(dá)0.01ng,熒光和電化學(xué)檢測器可達(dá)0.1pg。

    色譜柱可反復(fù)使用--用一根色譜柱可分離不同的化合物。

    樣品量少,容易回收--樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞,可以收集單一組分或做制備。

     

     

    液相色譜儀具體應(yīng)用:

    液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。

     

    與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,HPLC 所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離。

     

    HPLC成為解決生化分析問題zui有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域。液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向。

     

    液相色譜- 質(zhì)譜連用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等; 液相色譜- 紅外光譜連用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類,海水中的不揮發(fā)烴類,使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。

     

     

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