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進樣器是將樣品溶液準確送入色譜柱的裝置，分手動和自動兩種方式。現在的液相色譜儀所采用的手動進樣器幾乎都是耐高壓、重復性好和操作方便的六通閥進樣器，其原理與氣相色譜中所介紹的相同。隨著HPLC分析儀器的普及和其在自動化程度的提高，自動進樣模式取代了原來手動模式，它大大提高了工作效率，增強了分析的精度，消除了人為誤差等等優勢，越來越多的單位使用自動進樣器。一般來說，自動進樣器包括進樣臂、進樣針、樣品盤、清洗系統、驅動系統以及控制系統等部分組成，各個部分之間緊密合作，共同帶動著自動...

在使用高效液相色譜系統進行日常分析檢測的過程中，有時會遇到色譜峰峰面積重現性差的問題，導致無法對組分進行準確定量。出峰面積重現性差的話，首先要看保留時間是否穩定。如果保留時間都不穩定，那也不用說出峰面積的穩定了。而保留時間的穩定性，跟系統的壓力、流動相比例、流動相的脫氣以及色譜柱都有關系。導致色譜峰峰面積重現性差的常見原因及解決方法：1、檢查進樣量及進樣操作進樣量不符合要求或者進樣時操作失誤，都可能導致色譜峰面積重現性差。如果是使用手動進樣器且方法要求進樣量小于定量環體積，必...

液相色譜柱的損壞70-80%都是由于柱壓升高導致的，色譜柱使用了一段時間以后，壓力會有所升高，達到一定程度以后色譜柱就會報廢，如果在一天之內壓力升高了2-5個mpa，或者在幾次使用后壓力就翻倍的升高，這些都是異常狀況，那建議進行排除。一、色譜柱保存不當原因：色譜柱如較長時間不用，重新啟用后需按說明書的活化方法重新活化后再使用，否則也會出現柱壓升高，柱效下降。解決辦法：按說明書重新活化色譜柱。原因：除另有規定外，一般反相色譜柱都需保存在高比例有機相中，以防止微生物滋生。否則，重...

標準曲線法，分為外標法和內標法。外標法在液相色譜中用的較多。內標法準確但是麻煩，在標準方法中用的較多。1、外標法用被測化合物的純品作為標準樣品，配制成一系列的已知濃度的標樣。注入色譜柱的到其響應值（峰面積）。在一定范圍內，標樣的濃度與響應值之間存在較好的線性關系，即W=f×A，制成標準曲線。在*相同的實驗條件下，注入未知樣品，得到欲測組分的響應值。根據已知的系數f，即可求出欲測組分的濃度。外標法的優點：操作、計算簡單，是一種常用的定量方法；無需各組分都被檢出、洗脫；需要標樣；...

紫外檢測器的使用覆蓋面達到HPLC檢測器的75%，在各個領域得到了廣泛的應用，特別是在藥品、環保、生命科學、糧食科學、農業科學、食品科學、醫療衛生等領域，應用更加廣泛。國際上生產HPLC的廠商很多，無一不帶紫外檢測器。中國也有10幾家生產HPLC的企業。基本上都帶紫外檢測器。有的HPLC只有紫外檢測器一種，而無其它類型的檢測器。紫外檢測器不僅靈敏度高、噪音低、線性范圍寬、有較好的選擇性，而且對環境溫度、流動相組成變化和流速波動不太敏感，因此既可用于等度洗脫，也可用于梯度洗脫。...

C18色譜柱因鍵合方式的不同、粒徑的不同、長度的不同，內徑的差異等多方面因素，呈現出不同選擇性。這樣，在市場上就出現了數百種具有不同分離選擇特性的C18色譜柱。對于傳統的C18色譜柱，pH值使用范圍通常為2～7，因為pH值高于8時C18固定相會受到限制。由于殘余硅羥基的存在，易對堿性化合物造成不可逆吸附，造成峰拖尾，影響分離與分析。pH值太低則會使鍵合的烷基脫落，而且對成分的分離達不到要求。1、酸性條件下C18的選擇為了改善C18色譜柱在低pH值時的穩定性，有人提出了空間位阻...

紫外檢測器（ultraviolet－visibledetector，UVD）是HPLC中應用廣泛的檢測器之一，幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。其特點是靈敏度較高，線性范圍寬，噪聲低，適用于梯度洗脫，對強吸收物質檢測限可達1ng，檢測后不破壞樣品，可用于制備，并能與任何檢測器串聯使用。紫外檢測器主要由光源、分光系統、檢測池和檢測系統四大部分組成，從光源分光系統得到的特定波長的單色光通過檢測池時，一部分光被溶液中的吸光性溶質吸收，剩余的透射光到達檢測系統后光信號轉換成電信號...

色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環)、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。只有了解影響色譜柱性能的因素，才能結合目標分析物的性質、需要達到的分析效果及實驗室條件來選擇適合的色譜柱。(1)硅膠純度硅膠純度和殘留金屬離子濃度，硅膠的雜質會影響化合物的峰形，硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形，易發生拖尾。(2)色譜柱尺寸填料床的長度和內徑，增加色譜柱長度，可以在一定程度上提高柱效，但也會升高壓力和導致峰展寬；寬柱徑，提高載樣量，但也會增加橫向擴散，同樣會導致峰展寬。窄柱徑可以節約...